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一、選擇合適的SPE小柱
1、基于目標化合物性質
了解目標化合物的pKa和LogP等關鍵參數(shù)。pKa決定了化合物在不同pH下的電離狀態(tài),LogP反映化合物的疏水性。對于酸性化合物,可使其更易被反相SPE柱吸附;堿性化合物則在比pKa高2個單位的pH下更易吸附。根據(jù)這些性質選擇具有相應吸附特性的小柱,如對于極性較強的化合物可選擇正相SPE柱,而疏水性化合物適合反相SPE柱。
2、考慮樣品基質
樣品基質的復雜程度影響分離效果。如果樣品中含有大量雜質或復雜的生物成分,要選擇對目標化合物選擇性高的小柱。
二、優(yōu)化樣品前處理條件
1、pH值調整
合理的pH值能改變目標化合物在小柱上的吸附行為。在反相SPE中,對于中性化合物可不調節(jié)pH值以增強保留;而對于酸性或堿性化合物,需將pH值調整至合適范圍,提高萃取效率。
2、洗脫溶劑的優(yōu)化
洗脫溶劑的種類、體積和強度至關重要。根據(jù)目標化合物的性質和吸附劑類型選擇。同時,要確定合適的洗脫體積,確保目標化合物充分洗脫。
3、流速控制
適當?shù)牧魉儆兄谔岣叻蛛x效果。一般來說,流速過快會造成目標化合物未被充分吸附,如在反相SPE工作流程中,建議流速保持在每秒一滴或以下。
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